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丹磺酰氯可用于測定肽鏈的氨基末端

丹磺酰氯是一種強熒光劑，可用于測定肽鏈的氨基末端，能專一地與肽鏈N端α-氨基反應生成丹磺酰-肽，后者水解生成的丹磺酰-氨基酸具有很強的熒光，可直接用電泳法或層析法鑒定出N-端是何種氨基酸。丹磺酰氯是用于標記蛋白質和氨基酸的熒光試劑。

產品參數

別名： 丹酰氯，二甲氨基萘磺酰氯，Dansyl Chloride ，DNSCl，5-(Dimethylamino)-1-naphthalenesulfonyl chloride， 

性狀：   橙黃色粉末

CAS號： 605-65-2

分子式： C12H12CINO2S

分子量： 269.74

純度：   ＞98%

溶解性： 溶于丙酮

保存：2-8℃干燥。

丹磺酰氯高效液相色譜儀測氨基酸實驗 

原理：蛋白質樣品經酸或堿水解后再行用丹磺酰氯進行衍生蛋白質樣品經酸或堿水解后再行用丹磺酰氯進行衍生化作用溶解于流動相溶液，用具有C8反相柱熒光檢化作用溶解于流動相溶液，用具有C8反相柱熒光檢測器的反相液相色譜進行測定，能很好地測定出各種測器的反相液相色譜進行測定，能很好地測定出各種氨基酸的含量。 

實驗步驟 

1、樣品處理與測定 

（1）蛋白質的水解：稱取1毫克的蛋白質樣品或相當于1毫克蛋白質的樣品于玻璃管中，加入1毫升 6mol/L鹽酸后用磨口封口或燒結封口，移入110℃恒溫箱中加熱16小時，取出冷卻。用微量注射器取20微升水解樣液于小玻璃管中，加入10微升正亮氨-酸作為內標溶液，并在水浴中蒸發(fā)干燥。 

（2）衍生物制備及其測定：將上述干燥制備的樣品加入40微升 pH=10.5 緩沖溶液，接著加入100 微升丹磺酰氯工作試劑，緊密封住管口，充分振搖15分鐘，將樣品管在100℃ 水浴中加熱2分鐘，取出冷卻。吸取1毫升以1：1的比例相混合的甲、乙兩種流動相的混合溶液于樣品管中，充分振搖15秒，吸取10微升左右的此樣品溶液注入液相色譜柱內，記錄色譜圖。 

2、校正因子fi的確定用微量注射器吸取氨基酸標準混合溶液20微升于小玻璃管中，加入10微升正亮氨-酸作為內標溶液，并在水浴中蒸發(fā)干燥，然后按樣品處理中的方法制備標準氨基酸的衍生物，再加入1毫升流動相混合溶液，用微量注射器吸取5-10微升經衍生化的氨基酸溶液進入色譜儀，記錄色譜圖，并確定各氨基酸的出峰保留時間和峰面積，以及測量內標物和各氨基酸的峰面積，并求出各氨基酸校正因子fi。

丹磺酰化法分析蛋白質 N-末端氨基酸實驗 

原理：蛋白質的α-氨基與丹磺酰氯(DNS-Cl 是一種熒光物質) 反應, 生成DNS-蛋白質, 經水解可生成DNS-氨基酸。通過聚酰胺薄膜層析分析DNS-氨基酸, 可確定蛋白質的N-末端氨基酸。此法靈敏度高, 也可用于蛋白質的氨基酸組成的測定。聚酰胺對極性物質的吸附作用是: 它能和被吸附物質間形成氫鍵, 這種氫鍵的強弱決定了被分離物與聚酰胺薄膜之間吸附能力的大小。層析時展層劑與被分離物在聚酰胺膜表面競爭形成氫鍵。因此選擇適當的展層劑使分離物在聚酰胺表面發(fā)生吸附、解吸附、再吸附和再解吸附的連續(xù)過程, 就能導致分離物達到分離的目的。