谷氨酰胺合成酶檢測試劑盒檢測速度就是快！
谷氮酰胺合成酶，是衡量植物氮素同化水平的一項(xiàng)重要生理指標(biāo)。谷氨酰胺這種氨基酸，不僅被細(xì)胞用來合成蛋白質(zhì)，也是用來運(yùn)輸氨的。自由的銨離子對(duì)生物有毒性，在血液中不能太多，但是一些生物過程又會(huì)產(chǎn)生游離的銨離子；所以就讓谷氨酰胺來運(yùn)輸這些銨離子。當(dāng)細(xì)胞需要運(yùn)輸多余的銨離子的時(shí)候，就用銨離子和谷氨酸來合成谷氨酰胺，同時(shí)消耗ATP。谷氨酰胺合成酶催化的就是這個(gè)反應(yīng)。這個(gè)反應(yīng)分成兩步進(jìn)行，酶先讓ATP和谷氨酸反應(yīng)，生成γ-谷氨酰；接著銨離子上來，替換掉。在高等植物的研究中，GS也常被定義為植物氨同化所必需的酶。人谷氨酰胺合成酶叫做hGS。
測定原理
GS 在ATP 和Mg2+存在下，催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺；谷氨酰胺進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為γ─
谷氨?；惲u肟酸，在酸性條件下與鐵形成紅色的絡(luò)合物；該絡(luò)合物在540nm 處有大吸
收峰，可用分光光度計(jì)測定。
所需的儀器和用品
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、
研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液：100mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：10mL×1 瓶，-20℃保存。
試劑二：10mL×1 瓶，-20℃保存。
試劑三：粉劑×2 瓶，-20℃保存。用時(shí)每瓶加入5mL 蒸餾水充分溶解備用，用不完的試劑仍
-20℃保存。
試劑四：15mL×1 瓶，4℃保存。
谷氨酰胺合成酶檢測試劑盒檢測速度就是快！
樣本測定的準(zhǔn)備
1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備：
細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量
（104 個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1 的比例（建議500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL 提
取液），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30 次）；
8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10 的比例（建議稱取約0.1g 組織，
加入1mL 提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
2、血清（漿）樣品：直接檢測。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下：
1、快速簡便：操作時(shí)間短，48-50T，可測40例樣本左右，96-100T,可測80例樣本左右；
2、取樣量微：常規(guī)操作取樣量50l， 酶標(biāo)儀操作僅需5l即可檢測，部分試劑盒取樣多少請；
3、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放3個(gè)月有效；
4、再現(xiàn)性好：20倍稀釋線性仍然良好；
5、回收試驗(yàn)： X =99%；
6、受外界影響因素小：干擾因素少，重復(fù)性強(qiáng)；
7、測試面廣：可測動(dòng)物血清(漿)、組織、各種體液、灌流液、各種培養(yǎng)細(xì)胞以及細(xì)胞培養(yǎng)上清液等，部分試劑盒適用于檢測植物，可以。
谷氨酰胺合成酶檢測試劑盒檢測速度就是快！
在線咨詢