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睪酮放免實驗檢測,睪酮放免檢測現(xiàn)貨
更新時間:2021-01-25   點擊次數(shù):1726次

睪酮放免實驗檢測,睪酮放免檢測現(xiàn)貨!南京信帆生物睪酮放免檢測,歡迎大家!

                                                              

碘[125I]睪酮

放射免疫分析藥盒說明書

 

【藥品名稱】

 

通用名:碘[125I]睪酮放射免疫分析藥盒

 

英文名:Iodine[125I] Testosterone Radioimmunoassay Kit

 

漢語拼音:Dian [125I] Gaotong Fangshemianyifenxi Yaohe

 


【成分】

             規(guī)格

成分    

100管

制品狀態(tài)

1)T標準品(S0-S5)

6瓶(S0:1ml, 其它0.5ml/瓶)

液   體

2) T質(zhì)控血清

2瓶(0.5ml/瓶)

液   體

3)125I-T(紅色)

1瓶(10ml)

液   體

4)兔抗-T抗體(藍色)

1瓶(10ml)

液   體

5) 驢抗兔免疫分離劑

1瓶(50ml)

液   體

【性狀】液體組分(免疫分離劑除外)應(yīng)澄清,無沉淀或絮狀物;凍干組分應(yīng)呈疏松狀,復溶后應(yīng)無沉淀或絮狀物。

【放射性核素半衰期】本品所用核素為碘[125I],其物理半衰期(T1/2)為60天。

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【意義】

睪酮(testosterone, T)是一種19碳甾體激素,分子量288D,男性主要由睪wan間隙細胞分泌,少量來自腎上腺皮質(zhì);女性主要由腎上腺網(wǎng)狀帶分泌。睪酮是雄性激素中活性強的一種激素,其主要生理作用系維持男性第二性征和正常性腺功能,以及促進蛋白質(zhì)合成代謝等。

本藥盒主要用于血清中睪酮含量的測定,對男性性早熟、男性性功能低下、陽萎、睪wan發(fā)育不全、睪wan細胞瘤、女性特發(fā)性多毛癥以及Cushing氏綜合征等內(nèi)分泌疾病的診斷均有重要意義。

血清T增高常見于:睪wan良性間質(zhì)細胞瘤、先天性腎上腺皮質(zhì)增生癥、真性性早熟癥、皮質(zhì)醇增多癥、女性男性化腫瘤、女性特發(fā)性多毛癥、多囊卵巢綜合癥、注射睪酮或促性腺激素、肥胖以及中晚期孕婦等。

血清T降低常見于:男性性功能低下、原發(fā)性睪wan發(fā)育不全性幼稚、垂體功能減退、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(陽性率約50%)、陽萎、骨質(zhì)疏松癥、垂體性矮小癥、甲狀腺功能減低、高PRL血癥、部分男性乳房發(fā)育、外傷后性功能減退、隱睪炎等。

【測定原理】

本藥盒采用競爭放射免疫分析法,即標準或待測樣品中的T和125I-T共同與*的特異性睪酮抗體在適宜的條件下進行競爭性結(jié)合反應(yīng)。一部分125I-T與抗體結(jié)合形成復合物,而另一部分呈游離狀態(tài)。125I-T與抗體結(jié)合的比例取決于標準或待測樣品中非標記T的含量,非標記T的含量越高,125I-T與抗體形成復合物越少;非標記T的含量越低,125I-T與抗體形成復合物越多??乖?抗體復合物用免疫分離劑沉淀下來,測定沉淀物的放射性計數(shù)。經(jīng)過適當?shù)臄?shù)據(jù)處理后可獲得標準曲線,從標準曲線上查出被測樣品的睪酮含量(數(shù)據(jù)可由計算機自動處理)。

【適用儀器】適用于各類ν-放射免疫分析儀。

【樣本要求】

取靜脈血分離血清,待測;如不立即測量,可將樣品密封后,置于2~8℃或-20℃儲存?zhèn)錅y,2~8℃保存不應(yīng)超過1周,-20℃保存不超過2個月。冰凍樣品在保存過程中應(yīng)避免反復凍融。冰凍樣品測定前,將樣品置于室溫或常溫水中融化,并充分搖勻!

【用法用量】

1 試劑配制、使用方法和保存

.1 T標準品:淡黃色液體,直接使用。濃度依次為:0、0.1、0.5、2、8、20ng/ml,2~8℃保存42天內(nèi)穩(wěn)定;-20℃冷凍保存,標識的有效期內(nèi)穩(wěn)定,應(yīng)避免反復凍融。

  • 125I-T:紅色液體,直接使用。含1~3μCi  125I標記的19位睪酮衍生物,2~8℃保存,標識的有效期內(nèi)穩(wěn)定。
  • 兔抗-T抗體:藍色液體,直接使用。2~8℃保存,標識的有效期內(nèi)穩(wěn)定;開封后42天穩(wěn)定。
  • 驢抗兔免疫分離劑:液體,加樣前充分搖勻。2~8℃保存標識的有效期內(nèi)穩(wěn)定。開封后45天內(nèi)穩(wěn)定。
  • T質(zhì)控血清:淡黃色液體,直接使用。2~8℃保存42天內(nèi)穩(wěn)定,―20℃冷凍保存標識的有效期內(nèi)穩(wěn)定,應(yīng)避免反復凍融。附值見質(zhì)控血清使用說明書。

2測定步驟

取圓底聚苯乙烯試管若干,用記號筆或特殊鉛筆編號NSB、S0-S5和待測樣品管等,然后用微量加樣器按下表加樣。加樣前試劑(尤其分離劑!)包括待測樣品要搖勻,并且平衡到室溫。

加樣順序表:                            單位:μl

         管  別

 試  劑

總T管

NSB管

S0管

S1~5管

樣品管

及質(zhì)控管

蒸餾水

―

100

―

―

―

T標準品S0

―

50

50

―

―

T標準品S1~5

―

―

―

50

―

待測樣品或質(zhì)控

―

―

―

―

50

125I-T

100

100

100

100

100

兔抗-T抗體

―

―

100

100

100

充分搖勻,37℃水浴1小時

驢抗兔免疫分離劑

―

500

500

500

500

    充分搖勻,室溫放置15分鐘,3500轉(zhuǎn)/分離心15分鐘,吸棄上清液,在γ計數(shù)器上測定各沉淀管的放射性計數(shù)。

3數(shù)據(jù)處理

  • 聯(lián)機處理: 由電腦自動處理得出結(jié)果。注意放射免疫方法和免疫放射方法由于原理不同,處理軟件也不一樣,用戶一定要使用適合的處理軟件進行數(shù)據(jù)處理。在此建議用戶使用log-logit或四參數(shù)數(shù)據(jù)處理模式。
  • 手工作圖或計算器處理:
    •  百分結(jié)合率計算:設(shè)S0管計數(shù)為B0,各標準管或樣品管計數(shù)為B,非特異管計數(shù)為NSB,則百分結(jié)合率計算公式為B/ B0=(B-NSB)/( B0-NSB)×

3.2.2 logit計算:各標準點或樣品管的logit值計算公式為logit=ln[(B/ B0)/(1-B/ B0)]

3.2.3 手工作圖:以標準濃度取log值為橫坐標,對應(yīng)的logit值為縱坐標在普通坐標紙上或以標準濃度為橫坐標,對應(yīng)的B/B0為縱坐標在log-logit坐標紙上畫出標準曲線(理想化時是一條直線)。根據(jù)待測樣品的B/B0可以從坐標紙上查出樣品的濃度值。注意:如果使用普通坐標紙,查出的數(shù)值應(yīng)取反對數(shù)才是zui后的濃度值。

3.2.4計算器處理:使用有線性擬合功能的計算器,可以比較方便地計算出樣品濃度值,具體操作方法請查閱計算器的使用說明書。

3.3 尿液中睪酮的測定方法及數(shù)據(jù)處理

3.3.1收集24小時尿,量總體積,混勻后取尿液0.2ml,加 0.25N鹽酸0.8ml,于30℃水浴水解20~24小時,以此水解尿作為測定樣品。

3.3.2取水解尿樣品25μl,加到樣品管中,用緩沖液(此緩沖液為睪酮水解尿)補到50ul即加25ul測尿緩沖液。該緩沖液為0.24M Triss溶液,其作用是將強酸性的水解尿樣品調(diào)整為接近中性,否則會使測定值嚴重失真(偏高)!,

3.3.3 24小時睪酮尿含量的計算:

尿液濃度= A·V1/V2·50/V3 ng/ml=10A ng/ml

24小時尿中睪酮總量=A·V1/V2·50/V3·Dng=0.01A·Dμg

其中: A—從標準曲線上查得睪酮的濃度(ng/ml)

V1——水解尿的總體積(1ml)

V2——被水解的尿體積(0.2ml)

V3——水解尿加入的體積(25μl)

50為加入測量管中水解尿與緩沖液的總體積

D—24小時總尿量(ml)

    例如:某正常人24小時總尿量為2000ml,在標準曲線上查出濃度為3.8ng/ml,則:

尿液濃度=10×3.8ng/ml=38ng/ml。

24小時尿中睪酮總量=0.01×3.8×2000μg =78μg。

3.4 標準曲線舉例(僅供參考,不得用于實際計算)。濃度單位ng/ml

項目

NSB

0

0.1

0.5

2

8

20

百分結(jié)合率(%)

B/T

B/B0

2.7

76.9

81.3

54.5

31

12.8

7.3

Log-logit主要曲線參數(shù)

A=0.30         B=-1.75        R=-0.9997

ED75=0.16     ED50=0.67     ED25=2.86

 

【參考正常值】

下列所提供的數(shù)據(jù)僅供參考,每個實驗室都應(yīng)根據(jù)本實驗室的條件及接觸的人群建立自己實驗室睪酮的正常值范圍。

1.人血清睪酮參考正常值:                  (單位:ng/ml)

性  別

年 齡(歲)

平 均 值

范 圍

男性成人

15~69

5.75

3.2~14.6

女性成人

15~74

0.48

0.05~1.2

男性青春期前

2~10

0.13

0~0.5

女性青春期前

2~10

0.12

0~0.48

  • 尿液中睪酮參考正常值:

      成年男性:47~117μg/24小時尿;

      成年女性:0.5~12μg/24小時尿。

  • 唾液中睪酮參考正常值: 

成年男性:0.15~0.25ng/ml;

成年女性:卵泡期0.08~0.13ng/ml,排卵期0.24~32ng/ml,黃體期0.11~0.15ng/ml。

單位換算:1 ng/ml =100ng/dl=1000ng/l=1μg/l=3.46nmol/l

由于地區(qū)及使用儀器不同,所測的正常值會存在一定的差異,所以本說明書提供的正常值僅作參考。各實驗室能建立符合本實驗室要求的正常值范圍。

【產(chǎn)品性能指標】

  • 測定范圍:0.1~20ng/ml;
  • 靈敏度:0.02ng/ml;
  • 精密度:批內(nèi)變異CV<10%;批間變異CV<15%。
  • 特異性:19位睪酮抗體與下列睪酮類似物的交叉反應(yīng)率如下:

       雙氫睪酮     1.1×10-2%        雌二醇     2.1×10-2%

     雌 三 醇     2×10-15%         孕  酮     3.2×10-2%

     雄烯二酮     1.2×10-5%

5.使用期限:見產(chǎn)品外包裝。

【禁忌】本品僅供體外診斷用!
【注意事項】

  • 收到試劑盒后,盡快存放在2~8℃。
  • 使用前請詳細閱讀此說明書。
  • 當樣品中睪酮濃度高于20ng/ml時,可將樣品用“0”標準或較低含量的女性血清稀釋5~10倍后復測,測定濃度乘以稀釋倍數(shù)即為樣品濃度。
  • 不同藥盒或不同月份的同種藥盒的組分不得混用。
  • 吸棄上清液時,注意不得損失沉淀物,否則將明顯影響測定結(jié)果。
  • 藥盒請在有效期內(nèi)使用。
  • 標本均應(yīng)視為有潛在傳染性,請按傳染病實驗室規(guī)程操作。
  • 使用本藥盒應(yīng)注意放射防護,放射性廢棄物須按放射防護條例規(guī)定處理。
  • 使用本品的操作人員應(yīng)經(jīng)過專業(yè)技術(shù)培訓。

【孕婦及哺乳期婦女用藥】由于本品僅供體外診斷用,孕婦及哺乳期婦女不需接觸本品,所以對其健康無損害。
【兒童用藥】由于本品僅供體外診斷用,兒童不需接觸本品,所以對其健康無損害。

【貯藏】2~8℃保存。

【有效期】1個月。

【執(zhí)行標準】國家食品藥品監(jiān)督管理局《國家藥品標準》,國家藥典委員會  編 2005年5月,WS1-(R-41)-2004Z。

 

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