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信帆提供FSH放免檢測(cè),促卵泡生成激素放免檢測(cè)服務(wù)
更新時(shí)間:2018-01-18   點(diǎn)擊次數(shù):1323次

信帆提供FSH放免檢測(cè),促卵泡生成激素放免檢測(cè)服務(wù)。南京信帆生物專(zhuān)業(yè)從事放免實(shí)驗(yàn)檢測(cè)服務(wù),歡迎大家!

FSH放免檢測(cè),提供FSH放免實(shí)驗(yàn)檢測(cè)服務(wù)

【測(cè)定原理】

應(yīng)用均相競(jìng)爭(zhēng)原理,標(biāo)準(zhǔn)或樣品中的FSH和加入的125I-FSH共同與一定量的特異性抗體產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)性免疫結(jié)合反應(yīng)。125I-FSH與抗體的結(jié)合量與標(biāo)準(zhǔn)或樣品中FSH的含量呈一定的函數(shù)關(guān)系。用免疫分離試劑(PR)將結(jié)合部分(B)與游離部分(F)分離后,測(cè)定結(jié)合部分的放射性強(qiáng)度,并計(jì)算相應(yīng)結(jié)合率B/B0。用已知FSH標(biāo)準(zhǔn)含量與對(duì)應(yīng)結(jié)合率作圖,即得標(biāo)準(zhǔn)曲線。從標(biāo)準(zhǔn)抑制曲線上查知對(duì)應(yīng)結(jié)合率的待測(cè)樣品中FSH的含量。

 

試劑配制、使用方法和保存

  • FSH標(biāo)準(zhǔn)品:液體,直接使用,標(biāo)準(zhǔn)濃度分別為0、2.5、5、10、25、50、100mIU/ml。標(biāo)準(zhǔn)2~8℃保存,42天內(nèi)穩(wěn)定;未開(kāi)蓋的標(biāo)準(zhǔn)品2~8℃保存,標(biāo)識(shí)的有效期內(nèi)穩(wěn)定。
  • 125I-FSH:凍干品,用蒸餾水溶解,100管10ml溶解,50管5ml溶解。如一次加樣超過(guò)100管,兩瓶混合后使用。標(biāo)記物放射性不大于111KBq(3μCi),2~8℃保存,標(biāo)識(shí)的有效期內(nèi)穩(wěn)定。
  • 兔抗-FSH抗體:凍干品,用蒸餾水溶解,溶解方法見(jiàn)封底。同次實(shí)驗(yàn)抗體加樣超過(guò)100管時(shí),兩瓶溶解后混合使用。抗體溶解后2~8℃保存可穩(wěn)定42天,凍干品-20℃保存有效期內(nèi)穩(wěn)定。
  • 驢抗兔免疫分離劑:液體,直接使用,但加樣前必須搖勻!2~8℃保存,有效期內(nèi)穩(wěn)定。開(kāi)封后zui多穩(wěn)定45天。若加樣超過(guò)100管,兩瓶混合后搖勻。
  • FSH質(zhì)控血清:使用方法,保存條件,有效期及附值,詳見(jiàn)質(zhì)控血清使用說(shuō)明書(shū)。

?

數(shù)據(jù)處理

  • 聯(lián)機(jī)處理: 由電腦自動(dòng)處理得出結(jié)果。注意放射免疫方法和免疫放射方法由于原理不同,處理軟件也不一樣,用戶一定要使用適合的處理軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。在此建議用戶使用log-logit或四參數(shù)數(shù)據(jù)處理模式。
  • 手工作圖或計(jì)算器處理:
    • 百分結(jié)合率計(jì)算:設(shè)S0管計(jì)數(shù)為B0,各標(biāo)準(zhǔn)管或樣品管計(jì)數(shù)為B,非特異管計(jì)數(shù)為NSB,則百分結(jié)合率計(jì)算公式為

B/ B0=(B-NSB)/( B0-NSB)×

3.2.2 logit計(jì)算:各標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)或樣品管的logit值計(jì)算公式為

logit=ln[(B/ B0)/(1-B/ B0)]

3.2.3 手工作圖:以標(biāo)準(zhǔn)濃度取log值為橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)的logit值為縱坐標(biāo)在普通坐標(biāo)紙上或以標(biāo)準(zhǔn)濃度為橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)的B/B0為縱坐標(biāo)在log-logit坐標(biāo)紙上畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線(理想化時(shí)是一條直線)。根據(jù)待測(cè)樣品的B/B0可以從坐標(biāo)紙上查出樣品的濃度值。注意:如果使用普通坐標(biāo)紙,查出的數(shù)值應(yīng)取反對(duì)數(shù)才是zui后的濃度值。

3.2.4計(jì)算器處理:使用有線性擬合功能的計(jì)算器,可以比較方便地計(jì)算出樣品濃度值,具體操作方法請(qǐng)查閱計(jì)算器的使用說(shuō)明書(shū)。

3.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線舉例(僅供參考,不得用于實(shí)際計(jì)算)。濃度單位mIU/ml

   項(xiàng)目

NSB

0

2.5

5

10

25

50

100

百分結(jié)合率(%)

B/T

B/B0

2.2

45

84.8

77.7

62.5

36.4

21.9

11.4

Log-logit數(shù)據(jù)處理模式主要曲線參數(shù)

A=2.82        B=-2.41         R=-0.9995

ED75=5.21     ED50=14.8     ED25=42.3

 

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