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谷草轉氨酶(GOT)試劑盒不同樣本的檢測方法
更新時間:2020-03-06   點擊次數(shù):915次

谷草轉氨酶(GOT)試劑盒不同樣本的檢測方法

 

產(chǎn)品說明:
GOT( 2.6.1.1)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,催化可逆轉氨基反應,是氨基
酸代謝的重要酶。此外,GOT 在心肌細胞中含量zui高,上一般常作為心肌梗塞和心肌炎的輔助檢查。肝臟損害時其血清濃度也可升高。

 

GOT 催化 α-酮戊二酸和天門東氨酸發(fā)生轉氨基反應,生成谷氨酸和草酰乙酸,草酰乙酸進一
步自行脫羧生成丙酮酸;丙酮酸可與 2,4-*肼反應生成 2,4-*腙,在堿性條件下顯棕紅色;測定 505nm 吸光度的變化,即可計算 GOT 酶活力。

 

試驗需自備的儀器和用品:
可見分光光計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、研缽、冰和蒸餾水。

 

操作步驟:

一、樣品測定的準備

1、 細胞或細菌樣品的制備 :

先收集細胞或細菌樣品到離心管內(nèi),棄上清,按照每 500 萬細胞或細菌加入 1mL 提取液,超聲波破碎細菌或細胞(功率 20%,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次)。3500g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
 

2、組織:
稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液進冰浴行勻漿。3500g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

 

3、血清(漿)樣品:直接檢測。

 

谷草轉氨酶要分布在心肌,其次是肝臟、骨骼肌和腎臟等組織中。正常時血清中的AST含量較低,但相應細胞受損時,細胞膜通透性增加,胞漿內(nèi)的AST釋放入血,故其血清濃度可升高,一般常作為心肌梗死和心肌炎的輔助檢查。谷草轉氨酶的正常值為0~40單位/升,當谷草轉氨酶明顯升高,谷草轉氨酶/谷丙轉氨酶(ALT)大于1時,提示有肝實質(zhì)的廣泛損害,預后不良。

 

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谷草轉氨酶(GOT)試劑盒不同樣本的檢測方法

 

 

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